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CCK-8試劑盒的檢測步驟及使用注意事項介紹
發布時間:2023-01-11   點擊次數:187次
  CCK-8試劑盒利用了同仁化學研究所(Dojindo)開發的四唑鹽——WST-8(2-(2-甲氧基-4-硝苯基)-3-(4-硝苯基)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四唑單鈉鹽),它在電子載體1-MethoxyPMS存在的情況下能夠被還原成水溶性的甲臜染料。
 
  CCK-8試劑盒的檢測步驟:
 
  1、向各孔中加入100μl細胞懸液。
 
  2、在37℃下預孵育培養板。
 
  3、向各孔中加入各濃度的待測溶液10μl。
 
  4、37℃下孵育。
 
  5、向各孔中加入10μl的CCK-8溶液。
 
  6、37℃下孵育1-4小時。
 
  7、測定450nm處的OD值。
 
  CCK-8試劑盒的使用注意事項:
 
  (1)使用適當的培養基制備50,000-100,000個/ml的細胞懸液。
 
  (2)建議使用CO2培養箱過夜預培養。
 
  (3)使用培養基或PBS來制備溶液。
 
  (4)如果待測溶液有還原性,測定不含細胞,但含有CCK-8的待測溶液在450nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入CCK-8,如果吸光度相對較大,則需要除去培養基,并用培養基洗滌細胞兩次,然后加入新的100μl培養基和10μlCCK-8進行檢測。
 
  (5)白細胞可能需要培養較長時間。
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